SK-N-MC細(xì)胞是一種人類神經(jīng)源性細(xì)胞系，最早于1971年9月由Biedler JL分離自一位14歲白種女童的眼眶上區(qū)神經(jīng)上皮瘤轉(zhuǎn)移灶。最初被認(rèn)為是神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系，但后續(xù)研究表明該細(xì)胞系實(shí)際上源于Askin腫瘤。常用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病及腫瘤生物學(xué)研究。

SK-N-MC細(xì)胞是一種假二倍體細(xì)胞系，雌性（XX）染色體，染色體數(shù)目主要在二倍體范圍內(nèi)，模式染色體數(shù)為46。在染色體組成方面，SK-N-MC細(xì)胞表現(xiàn)出多種異常，缺失N3和N10染色體，部分染色體如N1、N2、N4等為單體，同時(shí)出現(xiàn)多個(gè)標(biāo)記染色體，包括1p+、11q+等。其中特定標(biāo)記染色體與R.C.Seeger等研究中提到的相符。

SK-N-MC細(xì)胞特性特征

酶活性：SK-N-MC細(xì)胞具有中度的多巴胺-β-羥化酶活性，能夠合成和代謝兒茶酚胺。

熒光誘導(dǎo)：用甲醛處理后可誘導(dǎo)出熒光，表明SK-N-MC細(xì)胞內(nèi)存在兒茶酚胺。

抗原與基因特征：血型：O型血；Rh+。

同工酶表達(dá)：AK-1，1；ES-D，2；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，2；PGM1，1；PGM3，1-2

致瘤性：SK-N-MC細(xì)胞在倉鼠的臉頰和裸小鼠身上形成腫瘤。

轉(zhuǎn)移性：主要發(fā)生在眶上區(qū)

SK-N-MC細(xì)胞復(fù)蘇

將水浴鍋預(yù)熱至37℃，并準(zhǔn)備4 mL培養(yǎng)基（MEM + 10% FBS + 1% P/S）。

迅速將SK-N-MC細(xì)胞的凍存管放入37℃水浴中，解凍時(shí)間應(yīng)控制在1分鐘左右。

解凍后，立即用4 mL培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞懸液，輕輕混勻，以確保SK-N-MC細(xì)胞均勻分布。

在1000 RPM條件下離心4分鐘，棄去上清，以去除解凍過程中的雜質(zhì)。

用1-2 mL新鮮培養(yǎng)基重懸SK-N-MC細(xì)胞，并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中。

將培養(yǎng)瓶置于37℃、5% CO?的培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)，確保SK-N-MC細(xì)胞能夠順利貼壁。

SK-N-MC細(xì)胞傳代

當(dāng)SK-N-MC細(xì)胞的密度達(dá)到80%-90%時(shí)，進(jìn)行傳代操作。

棄去舊的培養(yǎng)基，用無鈣鎂的PBS輕輕洗滌SK-N-MC細(xì)胞1-2次，以去除殘留的培養(yǎng)基成分。

加入1 mL消化液（0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA），覆蓋SK-N-MC細(xì)胞表面，并放置于37℃培養(yǎng)箱中1-2分鐘。

觀察SK-N-MC細(xì)胞變圓并脫落后，立即加入培養(yǎng)基終止消化過程。

在1000 RPM條件下離心4分鐘，棄去上清，確保SK-N-MC細(xì)胞的完整性。

用新鮮培養(yǎng)基重懸SK-N-MC細(xì)胞，并按1:2的比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加8 mL培養(yǎng)基。

SK-N-MC細(xì)胞凍存

當(dāng)SK-N-MC細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，準(zhǔn)備進(jìn)行細(xì)胞凍存。凍存液配方為55%培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO。

棄去培養(yǎng)基后，用PBS清洗SK-N-MC細(xì)胞，然后加入胰酶進(jìn)行消化。

細(xì)胞回縮脫落后，加入凍存液終止消化反應(yīng)。

在1000 RPM條件下離心4分鐘，棄去上清后，用凍存液重懸SK-N-MC細(xì)胞，確保DMSO濃度為10%。

將SK-N-MC細(xì)胞懸液分裝至凍存管中，并使用程序降溫盒在-80℃預(yù)凍2小時(shí)，隨后轉(zhuǎn)移至液氮中長(zhǎng)期保存。

人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞的應(yīng)用場(chǎng)景非常廣泛，包括但不限于基礎(chǔ)研究、藥物開發(fā)、毒性測(cè)試和生物標(biāo)記物篩選。在基礎(chǔ)研究中，科學(xué)家們利用這種細(xì)胞系探索神經(jīng)母細(xì)胞瘤的分子機(jī)制；在藥物開發(fā)中，SK-N-MC細(xì)胞用于篩選和評(píng)估潛在的治療藥物；在毒性測(cè)試中，這種細(xì)胞系可以幫助評(píng)估化合物對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的毒性效應(yīng)；在生物標(biāo)記物篩選中，SK-N-MC細(xì)胞可用于發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證與神經(jīng)母細(xì)胞瘤相關(guān)的生物標(biāo)記物。  總之，人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞（SK-N-MC）是一種重要的科研工具，具有廣泛的應(yīng)用前景和研究?jī)r(jià)值。通過合理使用和嚴(yán)格管理，這種細(xì)胞系可以為神經(jīng)生物學(xué)和癌癥研究提供有力的支持